Incepand cu luna ianuarie 2014 , in cadrul Laboratorului Sanitar Veterinar si pentru Siguranta Alimentelor Bacau s-a infiintat o noua sectie de diagnostic de laborator , respectiv, BIOLOGIE MOLECULARA, prin tehnica reactiei de polimerizare in lant a ADN ( ACID DEZOXIRIBONUCLEIC), cu citire in timp real. Sectia este compusa din trei camere, respectiv, camera pregatire probe si extractie ADN, camera cuplare ADN/ARN, si camera aparate, unde are loc citirea si interpretarea rezultatelor. A fost validata intern metoda de ,,Determinare a speciei de provenienta din tesut muscular si preparate din carne”, urmand ca in viitorul apropiat sa se includa pe lista de metode analitice si ,,Determinarea genomului viral pentru Pesta Porcina Clasica” , ,,Determinarea genomului viral pentru Influenta aviara”, ,, Detectia Salmonella din produsele de origine animala”, ,, Detectia Organismelor Modificate Genetic din produsele de origine non-animala”. Timpul de realizare pentru fiecare tip de analiza este de 24 – 48 h, in functie de data comenzii. La Real-time PCR-ul din cadrul L.S.V.S.A. Bacau se pot lucra concomitent 96 probe. Reactia de polimerizare in lant (PCR) a fost pusa la punct la inceputul anilor ’80 de catre Kary Mullis care a primit de altfel si premiul Nobel pentru medicina deoarece aceasta tehnica a reusit sa revolutioneze studiul molecular avand aplicabilitate larga in domenii din ce in ce mai diverse : genetica, microbiologie, virusologie, hematologie, oncologie etc. Tehnica reactiei de polimerizare in lant, PCR, folosita pentru amplificarea ADN-ului, a avut un impact revolutionar asupra diagnosticului molecular. Tehnica se bazeaza pe cunoasterea secventei acidului nucleic pentru o regiune, care trebuie analizata repetat la indivizi diferiti in vederea formularii unui diagnostic. Tehnologia real-time PCR prezinta numeroase avantaje: acuratete mai mare a rezultatelor obtinute (efectuarea detectiei se realizeaza in faza precoce a reactiei, respectiv in faza de crestere exponentiala a amplificarii, cand se produce o dublare exacta a cantitatii de amplicon la fiecare ciclu; detectia in acest moment este optima in sensul ca rezultatele se coreleaza mai bine cu nivelul initial al tintei, comparativ cu tehnica PCR conventional, unde detectia are loc in faza de platou, dupa ce reactia a fost stopata iar produsii au inceput sa se degradeze; domeniu de linearitate mult extins (sunt necesare mai putine dilutii ale probelor); limita inferioara de detectie mult imbunatatita (se pot detecta cantitati mai mici ale ADN-ului tinta, avantaj esential, spre exemplu, in evaluarea raspunsului virusologic sustinut la pacientii cu hepatita cronica cu virus C. Diagnosticul molecular in domeniul parazitar, consta in evidentierea prin tehnica PCR a ADN-ului parazitar, utilizandu-se ca primeri secvente de ADN specifice. Metoda este folosita cu succes pe sange periferic, lichid cefalorahidian, lichid amniotic, tesut cerebral, corp vitros, umoare apoasa, lavaj bronhoalveolar.
Purtător de cuvânt dr. BALTĂ FLORIN CLAUDIU
